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Title: Evaluación de un bacteriófago con actividad lítica contra Escherichia coli mediante ensayos fisicoquímicos, genéticos y fenotípicos.
Authors: Toaquiza Vilca, María Belén
Director: Montiel Romero, Marynes
Keywords: BACTERIÓFAGO
CONTROL BIOLÓGICO
RESISTENCIA BACTERIANA
ANTIBIÓTICOS
ENSAYO
Issue Date: 12-Aug-2024
Publisher: Quito : EPN, 2024.
Citation: Toaquiza Vilca, M.B.(2024).Evaluación de un bacteriófago con actividad lítica contra Escherichia coli mediante ensayos fisicoquímicos, genéticos y fenotípicos.58 páginas. Quito : EPN, 2024.
Abstract: Environmental dissemination is a global concern, and bacteriophages represent a promising alternative for controlling antibiotic-resistant bacteria due to their high specificity, ability to self-replicate, and coevolution with the host. The objective of this research was to evaluate a bacteriophage with lytic activity against Escherichia coli through physicochemical, genetic, and phenotypic tests. Bacteriophages from lytic genera such as Felixunavirus, Dhillonvirus, and Justusliebigvirus were isolated from water and sediment samples from the Estero Salado, Guayaquil- Ecuador. However, only phage BME3, belonging to the last genus, managed to lyse E. coli strains with different antibiotic susceptibility phenotypes: 57.14% (8/14) resistant, 12.5% (1/8) intermediate, and 80% (4/5) sensitive. Likewise, BME3 infected strains of E. coli ATCC 25922 and Salmonella typhimurium ATCC 14028, and did not react with Bacillus sp., Vibrio sp., and Pseudomonas sp. BME3 demonstrated stability at temperatures below 60°C and in pH ranges between 3 to 11 and lacks sensitivity to chloroform. Through transmission electron microscopy, it was verified that BME3 belongs to the Caudoviricetes class, with the length of the icosahedral head and the contractile tail was 102.64±11.57 nm and 105.00±9.00 nm, respectively. The genome of phage BME3 consists of double-stranded DNA with a length of 147,371 bp, a GC content of 37.5%, and 15 tRNA genes. Furthermore, BME3 lacks lysogenic genes, antibiotic resistance, and virulence factors, indicating that this bacteriophage is safe for phage therapy.
Description: La diseminación ambiental es una preocupación mundial y los bacteriófagos representan una alternativa prometedora para el control de bacterias resistentes a antibióticos debido a su alta especificidad, capacidad de autorreplicarse y coevolución con el huésped. La presente investigación tuvo como objetivo evaluar mediante ensayos fisicoquímicos, genéticos y fenotípicos un bacteriófago con actividad lítica contra Escherichia coli. A partir de muestras de agua y sedimentos provenientes del Estero Salado, Guayaquil- Ecuador, se aislaron bacteriófagos pertenecientes a géneros líticos como Felixunavirus, Dhillonvirus y Justusliebigvirus. Sin embargo, solo el fago BME3, perteneciente al último género, logró lisar cepas de E. coli con diferentes fenotipos de susceptibilidad a antibióticos: 57,14% (8/14) resistentes, 12,5% (1/8) intermedio y 80% (4/5) sensible. Igualmente, BME3 infectó cepas E. coli ATCC 25922 y Salmonella typhimurium ATCC 14028, y no tuvo reacción contra Bacillus sp., Vibrio sp. y Pseudomonas sp. BME3 demostró estabilidad a temperaturas inferiores a 60°C y en rangos de pH entre 3 a 11, y carece de sensibilidad al cloroformo. Mediante, microscopía electrónica de transmisión se comprobó que BME3 pertenece a la clase Caudoviricetes, la longitud de la cabeza icosaédrica y la cola contráctil fue de 102,64±11,57 nm y 105,00±9,00 nm, respectivamente. El genoma del fago BME3 consta ADN bicatenario con 147 371 pb de longitud, con un contenido de GC del 37,5% y 15 genes de ARNt. Además, BME3 carece de genes lisogénicos, resistencia a antibióticos y virulencia, lo que indica que este bacteriófago es seguro para la fagoterapiaLa diseminación ambiental es una preocupación mundial y los bacteriófagos representan una alternativa prometedora para el control de bacterias resistentes a antibióticos debido a su alta especificidad, capacidad de autorreplicarse y coevolución con el huésped. La presente investigación tuvo como objetivo evaluar mediante ensayos fisicoquímicos, genéticos y fenotípicos un bacteriófago con actividad lítica contra Escherichia coli. A partir de muestras de agua y sedimentos provenientes del Estero Salado, Guayaquil- Ecuador, se aislaron bacteriófagos pertenecientes a géneros líticos como Felixunavirus, Dhillonvirus y Justusliebigvirus. Sin embargo, solo el fago BME3, perteneciente al último género, logró lisar cepas de E. coli con diferentes fenotipos de susceptibilidad a antibióticos: 57,14% (8/14) resistentes, 12,5% (1/8) intermedio y 80% (4/5) sensible. Igualmente, BME3 infectó cepas E. coli ATCC 25922 y Salmonella typhimurium ATCC 14028, y no tuvo reacción contra Bacillus sp., Vibrio sp. y Pseudomonas sp. BME3 demostró estabilidad a temperaturas inferiores a 60°C y en rangos de pH entre 3 a 11, y carece de sensibilidad al cloroformo. Mediante, microscopía electrónica de transmisión se comprobó que BME3 pertenece a la clase Caudoviricetes, la longitud de la cabeza icosaédrica y la cola contráctil fue de 102,64±11,57 nm y 105,00±9,00 nm, respectivamente. El genoma del fago BME3 consta ADN bicatenario con 147 371 pb de longitud, con un contenido de GC del 37,5% y 15 genes de ARNt. Además, BME3 carece de genes lisogénicos, resistencia a antibióticos y virulencia, lo que indica que este bacteriófago es seguro para la fagoterapia
URI: http://bibdigital.epn.edu.ec/handle/15000/25741
Type: masterThesis
Appears in Collections:Tesis Maestría en Biociencias aplicadas con mención en descubrimiento (FIQA)

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